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PCR實驗室設計

來源:蘇州邁萊柏系統(tǒng)工程有限公司發(fā)布時間2021.10.18


一、PCR實驗室布局

PCR實驗室原則上為試劑準備區(qū)、樣品制備區(qū)、擴增區(qū)和擴增產物分析區(qū)四個單獨的工作區(qū)域并設有專用走廊,各工作區(qū)域應設緩沖間,工作區(qū)與緩沖間宜安裝連鎖裝置。不同功能的工作區(qū)應是分隔獨立的,各工作區(qū)有明顯的標志,不能直通,如果緊密相連,需安裝物品傳遞窗。前兩區(qū)為擴增前區(qū),后兩區(qū)為擴增后區(qū),擴增前區(qū)與擴增后區(qū)應嚴格分開。實驗材料、試劑、記錄紙、筆、清潔材料等,只能從擴增前區(qū)流向擴增后區(qū),即從試劑準備區(qū)→樣品制備區(qū)→擴增區(qū)→擴增產物分析區(qū),不得逆向流動。實驗室的氣流也應從擴增前區(qū)流向擴增后區(qū),不得逆向流動。各工作區(qū)頂部應安裝紫外燈,紫外燈的波長為254nm,每20㎡一支40W的紫外燈。

驗室各區(qū)功能及主要設備

1、試劑準備區(qū):主要進行試劑的制備、分裝和主反應混合液的制備。試劑和用于樣品制作的材料應直接運送至該區(qū),不得經過其它區(qū)域。試劑原材料必須貯存在本區(qū)內,并在本區(qū)內制備成所需的試劑。本區(qū)主要設備有天平、冰箱、離心機、加樣器、振蕩器等。

對于氣流壓力的控制,本區(qū)并沒有嚴格的要求。

2、樣品制備區(qū):主要進行樣品的保存、核酸(RNADNA)提取、貯存及其加入至擴增反應管和測定DNA的合成。本區(qū)主要設備有冰箱、生物安全柜、離心機、加樣器、振蕩器、恒溫水浴等。

本區(qū)的壓力梯度要求為:相對于鄰近區(qū)域為正壓,以避免從鄰近區(qū)進入本區(qū)的氣溶膠污染。

3、擴增區(qū):主要進行DNA擴增。此外,已制備的DNA模板 (來自樣品制備區(qū))的加入和主反應混合液(來自試劑準備區(qū))制備成反應混合液等也可在本區(qū)內進行。本區(qū)主要設備有:擴增儀、冰箱、離心機、加樣器等。

本區(qū)的壓力梯度要求為:相對于鄰近區(qū)域為負壓,以避免氣溶膠從本區(qū)漏出。

4、擴增產物分析區(qū):擴增產物的測定。本區(qū)主要設備有酶標儀、洗板機、加樣器和水浴箱等。

本區(qū)的壓力梯度的要求為:相對于鄰近區(qū)域為負壓,以避免擴增產物從本區(qū)擴散至其它區(qū)域。

三、PCR實驗室通風系統(tǒng)及壓力控制

各區(qū)域之間應具備單向的實驗工藝流、物流、人流與氣流,形成單向流程的保護屏障,避免實驗之間的相互干擾,防止氣溶膠擴散對實驗過程造成污染。

PCR實驗室并沒有嚴格的凈化要求,但是為避免各個實驗區(qū)域交叉污染的可能性,宜采用全送全排的氣流組織形式,嚴格控制送、排風的比例以保證各實驗區(qū)的壓力要求。

四、PCR實驗室裝飾

實驗室圍護結構應牢固、氣密性好;所有陰陽角宜采用圓弧過渡;墻體內壁光潔、不積塵、耐腐蝕、易清洗消毒;地面使用PVC卷材或環(huán)氧樹脂自流坪,材料應滿足無縫隙、無滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。

五、PCR實驗室注意事項

1、幾個區(qū)域的大小設置情況,試劑準備區(qū)、擴增區(qū)、擴增產物分析區(qū),空間可以相對小一些,樣品制備區(qū)要放置生物安全柜和低溫冰箱,空間應大一些。

2、試劑準備區(qū)、樣品制備區(qū)設緊急洗眼器,以保證操作人員的安全。

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